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大豆內源基因Lectin核酸試劑盒廠家

產品簡介

大豆內源基因Lectin核酸試劑盒廠家
上海聯祖生物相關產品:
鈣素,大鼠芐氧羰?;拾彼?/br>
降鈣素基因相關肽(8-37),人5-溴

降鈣素基因相關肽Ⅱ,人硫酸銨

降鈣素基因相關肽,大鼠2,3,三氟溴

更新時間:2021-03-13
訪問次數:1242
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 大豆內源基因Lectin核酸試劑盒廠家

 規格

 48T

 貨號

 LZP8178

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
性成纖維生長因子6-吲哚

大內皮素-1(1-38),人1-丁基-甲基咪唑四氟酸鹽

大內皮素-1 (1-39),豬18-冠-6

腦鈉素-32,大鼠5-氨基-甲基-1,2,噻二唑

鈴蟾肽三叔丁氧基氫化鋁鋰

緩激肽(S)-(-)-N-芐基-alpha-甲基芐

緩激肽(1-5)甲基-甲

緩激肽(1-6)氨基-三氟甲氧基甲

緩激肽(1-7)6--3,二氫-1H-2-萘酮

頰肽甲氧基噻吩

酸酶,雞環甲酸

降鈣素,人(S)-2-基-1-

降鈣素,大鼠芐氧羰?;拾彼?/span>

降鈣素基因相關肽(8-37),人5-溴

降鈣素基因相關肽Ⅱ,人硫酸銨

降鈣素基因相關肽,大鼠2,3,三氟溴

蛋白酶1底物2m,熒光基-氟甲酸

蛋白酶3底物1m,熒光6-氨基-2-酚

ATP5AFST/FITC  熒光素標記抗卵泡抑素IgG20 ul

即刻早期基因ARCF1 operon positive regulatory proin(NT)/FITC  熒光素標記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端)IgG100 ul

ADP核糖基化因子6F1 operon positive regulatory proin(CT)/FITC  熒光素標記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(C端)IgG20 ul

芳香化酶Gab1/FITC  熒光素標記兔抗、大、接頭蛋白Gab 1IgG100 ul

ArminGab2/FITC  熒光素標記接頭蛋白Gab 2IgG100 ul

alpha 1腎上腺素能受體APhospho-Gab1 (Tyr627) /FITC  熒光素標記兔抗、大、接頭蛋白Gab 1IgG1 ml

血管緊張素Ⅱ-1型受體Phospho-Gab1 (Tyr659) /FITC  熒光素標記兔抗、大、接頭蛋白Gab 1IgG100 ul

活化轉錄因子3GABA-AR Alpha1/FITC  熒光素標記γ1氨基丁酸受體α1IgG100 ul

血管緊縮素樣蛋白1GABA-B-R1/FITC  熒光素標記抗g-氨基丁酸B1受體IgG100 ul
大豆內源基因Lectin核酸試劑盒廠家1號染色體開放閱讀框50抗體2,3-Dimethoxyxanthone中文名:2,3-二甲氧基呫噸酮別名:分子式:C15H12O4

1號染色體開放閱讀框49抗體Swertianin 2-O-α-L- rhampyrasyl-(1→2)-β-D-xylopyraside中文名:別名:7-O-[α-L-Rhampyrasyl-(1→2)-β-D-xylo pyrasyl]-1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone分子式:C25H28O14

1號染色體開放閱讀框53抗體1,5-Dihydroxy-6,7-dimethoxyxanthone中文名:1,5-二羥基-6,7-二甲氧基呫噸酮別名:分子式:C15H12O6

1號染色體開放閱讀框54抗體Symphone I中文名:別名:分子式:C38H48O6

1號染色體開放閱讀框55抗體Hyperxanthone中文名:別名:分子式:C18H14O5

 

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